茶葉中茶黃素的分離

　　茶葉中茶黃素的分離
　　(1)將粗提取物5g為1份，加入SephadexLH-20柱(用60％丙酮水溶液浸泡過夜)上，再用60％丙酮進行淋洗，流速lml／min，按每15ml收集1次洗脫液，測定光密度。會集E380nm／E460nm比值在2．5—3．0范圍內的部分，30℃下餾去丙酮，再用乙酸乙酯萃取，經無水硫酸鎂干燥，在30C下濃縮至干，得到明亮鮮紅色物。再經pH7，硅膠(SillicARCC-7100—200目)柱(0．8mX4cm)色譜分離，每1．0g溶于少量的丙酮：甲醇：水(25：6：2)系統，加入柱上，用三氯甲烷：丙酮：甲醇：水(40：25：6：2)進行淋洗，每15ml收集1次，可清楚地分離出每個橙紅色的部分。分別收集后于301Z下濃縮至于。洗出物的順序是：第一部分為TFl，第二部分為TF2，第三部分為T民。從柱上回收率約為82％。這三種產物分別經過硅膠柱分離提純一次，TFl分離物用含水甲醇再結晶后，得到TFl。；TP＼再結晶得到茶黃素—3，3’—雙沒食子酸酯；TF2再結晶得到茶黃素-3-沒食子酸酯和茶黃素—3，—沒食子酸酯的混合物。
　　(2)將粗提取物5g為1份加入柱(用35％丙酮水溶液將SephadexLH-20浸一夜裝柱)上，用35％丙酮水溶液淋洗，流速lml／min，洗脫液每15mi收集1次，測吸光度。先洗出的是兩個淡黃橙色帶BI和B2(最大吸收為400nm)，隨后洗出的是三個深橙色帶B3、B4和B5(最大吸收為380nm和460nm)。合并同一色帶的洗脫液，30C下餾去丙酮，再用乙酸乙酯萃取，萃取液用硫酸鎂干燥后濃縮至于，得到色素Pl、P2、P3、P4、P5。分別用聚酰胺薄層(展譜劑為甲醇)、硅膠(SillicARCC-7)薄層(展譜劑為三氯甲烷：丙酮：甲醇：水=40：25：6：2)，以及纖維素薄層(第一相為正丁醇：冰乙酸：水二4：1，2：2，第二相為2％乙酸)進行鑒定。表明n為茶黃酸；P2為表茶黃酸—3—沒食子酸酯；P3為茶黃素1b和茶黃素1c的混合物，可通過3mm厚的制備性紙譜分離(正丁醇：冰乙酸：水=4：1：2．2為展譜劑)進一步分離出這兩種物質；P4為茶黃素—3或-3'-沒食子酸酯；P5為茶黃素—3，3’—雙沒食子酸酯。